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怎样选择高效液相色谱柱


 

现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱柱填料的选择中。但是色谱柱填料的选责范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。今天小编就讲讲两种常规的材料的色谱质填料。

 

一、硅胶基质填料    

1、正相色谱

正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团 (ZH、APS)和氰基团(CN、CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强落的组份最先被冲洗出高效液相色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷、氯、二氯甲烷等。

 

2、反相色谱

反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对教弱的官能团的键合相。

反相色谱所使用的流动相极性教强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。

样品流出色谱柱的顺序是极性教强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在高效液相色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、 C8(MOS)、C4(B)C6H5等。


 

 

聚合物填料

聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等,其主要优点是在PG值为1-14均可使用。相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的淑水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,高效液相色谱柱柱效教低。



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