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高效液相色谱流动相的选择原则

高效液相色谱仪分析时流动相的选择原则:

1 选择色谱醇的溶剂作为流动相

不要随意加满溶剂瓶。作为分析流动相,应避免不必要的浪费,防止污染环境,危害身体健康。应该根据样哦数量,计算需要使用的溶剂体积,添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。因为有些有机溶剂长期放置易变质,比如四氢呋喃在光照下就容易变质,甲醇或乙醇长期放置会生成酯类,乙腈水溶液会分解为醋酸与氨,在分析时导致基线抬高,对一些分析,特别是质谱分析造成影响。
高效液相色谱流动相的选择原则

2 配置某些酸或碱性流动相时要考虑色谱柱的使用pH范围
有些酸并不适宜作为流动相,如盐酸、长期使用可能损坏泵及相关的钢制管线。注意选择合适的截止波长的溶剂作为流动相。
紫外分析时,样品的检测波长至少应大于所用溶剂的截止波长20nm上。

3 配置的盐溶液一定用滤膜过滤
常规液相用0.45µm滤膜过滤,高效液相色谱使用0.2µm滤膜过滤。水或缓冲盐溶液好置于棕色瓶中,以防长菌,阻塞溶剂过滤器,降低泵的操作性能。质谱分析不能使用不挥发性盐作为流动相。使用挥发性盐作为流动相时,在保证分析的条件下,流动相中的盐尽量保持低浓度。

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